氣相色譜中,柱溫是影響化合物保留時間的重要因素。使用中,應(yīng)注意柱溫的選擇,因為柱溫關(guān)系到:
①色譜柱固定液的壽命。若柱溫高于固定液的z高使用溫度,則會造成固定液隨載氣流失,不但影響柱的壽命,而且固定液隨載氣進(jìn)入檢測器,將污染檢測器,影響分析結(jié)果。
②分離效能和分析時間。若柱溫過高了,會使各組分的分配系數(shù)K值變小,分離度減小;但柱溫過低,傳質(zhì)速率顯著降低,柱效能下降,而且會延長分析時間。
③化合物保留時間。柱溫越高,出峰越快,保留時間變小。柱溫變化會造成保留時間的重現(xiàn)性不好,從而影響樣品組分的定性結(jié)果。一般柱溫變化1℃,組分的保留時間變化5%;如果柱溫度變化5%,則組分的保留時間變化20%
④色譜峰峰形。柱溫升高,正常情況下會導(dǎo)致半峰寬變窄,峰高變高,峰面積不變。但是組分峰高變高,以峰高進(jìn)行定量時時分析結(jié)果可能產(chǎn)生變化;反之柱溫降低,則相反。
既然柱溫變化對分析結(jié)果有重要影響,那么選擇合適的柱溫以及對柱溫進(jìn)行控制就很重要了。首先應(yīng)保證柱溫不高于固定液的z高使用溫度(即色譜柱的z高耐受溫度),避免固定液流失而影響色譜柱柱效和使用壽命;其次,選擇合適的柱溫,應(yīng)使難分離的兩組分達(dá)到預(yù)期的分離效果,峰形正常而分析時間又不長為宜,一般柱溫應(yīng)比試樣中各組分的平均沸點低20-30℃,通過試驗決定;對于沸點范圍較寬的試樣,應(yīng)采用程序升溫,按預(yù)定的加熱速度隨時間呈線性或非線性地增加溫度。一般升溫速度是呈線性的。
柱溫箱是高效液相色譜儀的重要配套裝置,它可以準(zhǔn)確、穩(wěn)定的控制色譜柱的使用溫度,對于提高色譜柱的柱效,改善色譜峰的分離度,縮短保留時間,降低反壓,保證分析樣品結(jié)果的重復(fù)性,具有不可忽視的作用。