針對填料保留機(jī)理的不同(填料保留目標(biāo)化合物或保留雜質(zhì)),操作稍有不同。
固相萃取操作一般有四步
一、填料保留目標(biāo)化合物
1、活化----除去小柱內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。
2、上樣----將樣品用一定的溶劑溶解,轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上。
3、淋洗----除去干擾物。
4、洗脫----用小體積的溶劑將被測物質(zhì)洗脫下來并收集。
二、填料保留雜質(zhì)
固相萃取操作一般有三步
1、活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。
2、上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱,此時大部分目標(biāo)化合物會隨樣品基液流出,雜質(zhì)被保留在柱上,
故此步驟要開始收集
3、洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集,合并收集液。
此種情況多用于食品或農(nóng)殘分析中去除色素。
一、固相萃取裝置采用哪種上樣方式適合?
目前市面上常用正壓上樣和負(fù)壓上樣兩種方式萃取,但負(fù)壓上樣因不能有效控制流速而造成回收率不穩(wěn)定和儀器重復(fù)性差等原因,所以主流廠家一般采用正壓上樣方式,全自動固相萃取儀采用高精度注射泵正壓上樣洗脫樣品,更加準(zhǔn)確地控制液體流速,從而顯著提高了儀器重復(fù)性并確保了樣品回收率。
二、樣品處理速度有什么要求?
單個樣品的固相萃取循環(huán)一般為20分鐘左右,一般廠家的固相萃取儀都差不多。所以,一般來說,儀器同步處理的樣品數(shù)越多,處理速度就越快。全自動固相萃取采用6通道+3種模式靈活萃取,提高了樣品處理速度。
三、能否有效避免萃取過程中流路的堵塞?
應(yīng)用過程中常遇到的問題:流路堵塞造成儀器故障。
在發(fā)生柱堵塞時,大部分不能自動檢測,使樣品和溶劑泄露,造成嚴(yán)重?fù)p失和交叉污染。流路內(nèi)置高靈敏壓力傳感器,當(dāng)流路壓力>0.6Mpa時,系統(tǒng)會自動報警,從而有效保護(hù)裝置。
四、能否對交叉污染進(jìn)行有效控制?
樣品和溶劑使用同一管路,易造成污染,尤其是無清洗功能的儀器,短時間內(nèi),管路就會殘留多種化合物,這是造成很多實驗失敗的根本原因。采用流路分離單元自動選擇溶劑,有機(jī)溶劑廢液有獨(dú)立的廢液通道,有效避免交叉污染。